1540 (MDXL, na numeração romana) foi um ano bissexto do século XVI do Calendário Juliano, da Era de Cristo, e as suas letras dominicais foram D e C (53 semanas), teve início a uma quinta-feira e terminou a uma sexta-feira.
6 de Janeiro - Casamento de Henrique VIII de Inglaterra com Ana de Cleves
9 de Julho - Dissolução do casamento de Henrique VIII de Inglaterra com Ana de Cleves
28 de Julho - Casamento de Henrique VIII de Inglaterra e Catarina Howard
3 de Agosto - Confirmação da doação da capitania da ilha Graciosa, Açores a D. Álvaro Coutinho.
7 de Setembro - Elevação de Faro, em Portugal, à categoria de cidade.
Publicação da Grammatica da Língua Portuguesa com os Mandamentos da Santa Madre Igreja por João de Barros - segunda gramática do idioma, primeiro livro didático ilustrado do mundo.
A Companhia de Jesus, criado pelo padre espanhol Ignácio de Loyola foi reconhecida pelo Papa Paulo II.
O explorador Hernando de Soto chega as aldeias de Towassa e Ikanatchati nos Estados Unidos, que originou as cidades de mesmo nome que hoje são a cidade de Montgomery capital do Alabama.
03 de Janeiro - Kaspar Bienemann, historiador eclesiástico e teólogo alemão (m. 1591).
18 de Janeiro - Catarina Guimarães, Duquesa de Bragança, pretendente ao trono português (m. 1614).
24 de Janeiro - Edmund Campion, jesuíta, missionário e mártir inglês (m. 1581).
26 de Janeiro - Wolfgang Ammon, teólogo luterano e compositor de hinos (m. 1589).
28 de Janeiro - Ludolph van Ceulen, matemático alemão (m. 1610)."
28 de Janeiro - Nicolò Donato, 93º Doge de Veneza, que reinou por apenas 35 dias, desde 10 de Abril de 1618 até a morte. (m. 1618).
20 de Fevereiro - Cornelis Joos van Hille, teólogo protestante holandês (m. 1598).
02 de Março - Edviges von Brandemburgo, Duquesa de Braunschweig-Volfembutel (m. 1602).
07 de Março - Philips van Marnix, burgomestre, escritor e chefe de estado holandês (m. 1598).